Detección de la fiebre tifoidea IgG IgM Reactivo de prueba rápida para el plasma del suero de sangre entera

Reactivo de detección rápida y eficiente para la fiebre tifoidea IgG/IgM

El dispositivo de prueba rápida de IgG/IgM tifoide es un inmunoensayo de flujo lateral para la detección y diferenciación simultáneas de IgG e IgM anti-Salmonella typhi (S. typhi) en sangre humana entera,suero o plasma.

Principio de detección

El dispositivo de prueba rápida de IgG/IgM para tifoides es un inmunoensayo cromatográfico de flujo lateral. El cassette de prueba consiste en: 1) una almohadilla conjugada de color borgoña que contiene S recombinante.el antígeno H y el antígeno O del tifus conjugados con oro coloide (conjugados tifoides) y los conjugados IgG-oro del conejo, 2) una banda de membrana de nitrocelulosa que contiene dos bandas de ensayo (bandas IgG e IgM) y una banda de control (banda C).La banda de IgM está pre-revestida con IgM anti-humano monoclonal para la detección de IgM anti-SEn el caso del tifo, la banda IgG está pre-revestida con reactivos para la detección de IgG anti-S. tifo, y la banda C está pre-revestida con IgG anti-conejo de cabra.Cuando se distribuye un volumen adecuado de muestra de ensayo en el pozo de muestreo de la cajaEn el caso de las muestras del paciente, la IgM anti-S. typhi se unirá a los conjugados tifoides.El inmunocomplejo es entonces capturado en la membrana por el anticuerpo IgM antihumano pre-revestido, formando una banda de IgM de color borgoña, lo que indica un resultado positivo de la prueba de S. typhi IgM.El inmunocomplejo es entonces capturado por los reactivos pre-revestidos en la membranaLa ausencia de bandas de prueba sugiere un resultado negativo. The test contains an internal control (C band) which should exhibit a burgundy colored band of the immunocomplex of goat anti rabbit IgG/rabbit IgG-gold conjugate regardless of the color development on any of the test bandsDe lo contrario, el resultado del ensayo no será válido y la muestra deberá volver a ensayarse con otro dispositivo.

Recolección y almacenamiento de muestras

Todos los reactivos están listos para su uso tal como se han suministrado.asegurarse de que el dispositivo de ensayo esté a temperatura ambiente antes de abrirloEl dispositivo de ensayo es estable hasta la fecha de caducidad impresa en la bolsa sellada.

Recolección y manipulación de las muestras

• El dispositivo de prueba rápida de IgG/IgM tifoide (sangre entera/suero/plasma) se puede realizar con sangre entera (de punción venosa o punción de dedos), suero o plasma.
• Para recolectar muestras de sangre entera: Lavar la mano del paciente y dejar que se seque. Masajear la mano sin tocar la punción.Borrar el primer signo de sangreFrote suavemente la mano de la muñeca a la palma del dedo para formar una gota redondeada de sangre sobre el sitio de la punción.Añadir la muestra de sangre entera de Fingerstick al dispositivo de ensayo mediante un tubo capilar o gotas colgantes.
• Separar el suero o el plasma de la sangre lo antes posible para evitar la hemólisis.
• Los ensayos deben realizarse inmediatamente después de la recogida de las muestras y no dejarlas a temperatura ambiente durante períodos prolongados.Las muestras de suero y plasma pueden almacenarse a 2-8°C durante un máximo de 3 días.Para el almacenamiento a largo plazo, las muestras deben mantenerse a menos de -20°C. La sangre entera recolectada por punción venosa debe almacenarse a 2-8°C si el análisis se va a realizar dentro de los 2 días siguientes a la recolección.No congele muestras de sangre enteraLa sangre entera recolectada por el dedo debe ser examinada inmediatamente.
• Antes del ensayo, las muestras deben ser llevadas a temperatura ambiente. Las muestras congeladas deben descongelarse por completo y mezclarse bien antes del ensayo. Las muestras no deben congelarse ni descongelarse repetidamente.
• Si se van a enviar especímenes, éstos deben empacarse de conformidad con la normativa local relativa al transporte de agentes etiológicos.

Encuesta Procedimiento

Antes del ensayo, dejar que el dispositivo de ensayo, la muestra, el amortiguador y/o los controles alcancen la temperatura ambiente (15-30°C).

1. Retire el dispositivo de ensayo de la bolsa sellada y use lo antes posible.
2. Coloque el dispositivo de ensayo en una superficie limpia y plana.Sangre entera, suero o plasmamuestras: sostenga el gotero en posición vertical y transfiera2 gotas de muestra(o aproximadamente 50 μL) en el pozo de la muestra (S) del dispositivo de ensayo, y luego añadir1 gota de tampóny arranca el temporizador.Dedo en la sangre enteraejemplares:

Para utilizar un tubo capilar: llene el tubo capilar ytransferencia de aproximadamente 50 μL (o 2 gotas) de sangre entera de pinchazos de dedosla muestra en el pozo de muestra (S) del dispositivo de ensayo, y luego añadir 1 gota de tampóny arranca el temporizador.

1. Espera a que aparezcan las líneas de color.Lea los resultados en 10 minutos.No interprete los resultados después de 20 minutos.

Interpretación de los resultados

Las limitaciones de la prueba

1. El procedimiento de análisis y la interpretación de los resultados de la prueba deben seguirse de cerca al evaluar la presencia de anticuerpos contra S. typhi en suero o plasma de individuos.El incumplimiento del procedimiento puede dar resultados inexactos.
2. La prueba rápida de IgG/IgM tifoidea se limita a la detección cualitativa de anticuerpos contra S. typhi en suero o plasma humano.La intensidad de la banda de ensayo no tiene una correlación lineal con el título del anticuerpo en la muestra..
3. La prueba rápida de IgG/IgM para tifoides también detecta anticuerpos para-tifoides.
4. Un resultado negativo para un sujeto individual indica la ausencia de anticuerpos anti-S. typhi detectables. Sin embargo, un resultado negativo no excluye la posibilidad de exposición a S. typhi.
5. Puede producirse un resultado negativo si la cantidad de anticuerpos anti-S. typhi presentes en la muestra está por debajo del límite de detección del ensayo,o los anticuerpos detectados no están presentes durante la etapa de la enfermedad en la que se recolecta una muestra.
6. Si el síntoma persiste, mientras que el resultado de la prueba rápida de IgG/IgM de tifoides es negativo o no reactivo,se recomienda volver a tomar muestras del paciente con unos días de retraso o realizar el ensayo con un método de ensayo alternativo, como el método de cultivo bacteriano.
7. Algunas muestras que contengan un título inusualmente alto de anticuerpos heterófilos o factor reumatoide pueden afectar los resultados esperados.

Componentes del kit

• Dispositivos de ensayo •
• Las goteras
• El buffer
• Insertado en el prospecto

Materiales requeridos pero no suministrados

• Contenedores de recogida de muestras
• Lancetas (sólo para pinchar sangre entera)
• Centrífuga
• El temporizador
• Tubos capilares heparinizados y bulbo dispensador (sólo para la extracción de sangre entera por punción de dedos)